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Eléments de microbiologie (2) :: post
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Post nº2 (id2083) envoyé par Gaël  le 09 Jun 2006, 09:35
J'viens de passer l'oral... C'est la dernière année de M. Werenne donc ce post servira surement à ke dalle mais soit...

Question 8: Interferons: définition + comment l'obtenir + propriétés + ...

Question 6: Virus: Expliquer les différents types de virus + mode de reproduction +...

En gros, il te pose une question de base, mais t'y réponds comme tu veux.
J'm'explique, pour les virus, j'lui ai donné les différents critères qui différencient les virus, puis de là, j'ai parlé des différents virus à ARN (monocaténaires linéaires non fragmentés +, -, fragmentés, bicaténaires) et de là, on a discuté jusqu'à ce qu'il me dise qu'on passe à la question suivante ce qui m'a pas permis d'expliquer le mode de reproduction.

Pour l'article à préparer, il te laisse aller dans le sens que tu veux et limite, il te pose qq questions genre le role de l'ingénieur,...

Il est très très sympa et c'est plus une discussion d'une demi heure. Il note tout ce que tu dis. Pour ma part, j'ai pas dis de conneries et j'ai préféré dire que j'savais plutot que tenter des réponses intuitives. Il donne pas les points mais te donne son appréciation.

Post nº1 (id1643) envoyé par Reçu de Sandrine  le 14 Jan 2006, 18:03
Microbio : Question de l’oral 2004


1) Le virus: définition


2) c’était tout sur les virus, ça contient quoi, quelle forme ça a (icosaèdre et l’autre je me rappelais plus), les différentes façons de rentrer dans la cellule, comment ça agit dedans, quand ça se reproduit, qu’es-ce qui se passe (soit par lise de la cellule, soit ça reste à l’intérieur et ça utilise la mitose alors cellule transformée, soit par exocytose).


3) Stratégie de réplication des virus


4) culture de cellules (substrat de culture, Hayflick, Inhibition de contact, ancrage...+ détailler ces 4 points, c'est un minimum)


5) Les cellules normales et les cellules transformées


6) différents types de cultures cellulaires (je c ca fait peur)
g parlé des points importants (adhérence, inhibition de contact, prélèvement de cellules, hayflick, ...)
mais comme il dit ce sont des "questions ouvertes" et g autant parlé de cultures de cellules que d'interférons, de virus et de tumeurs
ca dépend de ce ke tu lui raconte :-)


7) Culture de cellule, montée en échelle
• Détailler les 5 points
-SUPPORT : verre ou plastique, avec polarité spécifique(+ je crois)
- Inhibition de croissance.
- Nutrition :Carbone ,AA,…
-Prélèvement :par exemple dans tissu, utiliser enzyme protéase pour séparer les molécules accrochées entre elles par les protéines de la couche bilipdique.
-Hayflick :qu’en est-il des cellules transformées ?
+Travail dans conditions stériles
Montée en échelle, avoir surface plus grande et microbilles en collagène pour mieux adhérer et avoir une surface plus grande.
Ct les retirer de la surface : enzyme protéase pour empêcher le lien via les filaments d’actine relié par les myosines.

• Montee en echelle
Alors parler de l'inhibition de contact,heyfflick, de l'adherence; une cellule normale ca ne se divise pas qd c seul, cellule normale vieillissent et meurent,vous donnez tous les parametres qui peuvent influer (t°,p, isolation bacterie, support verre, plastique traité; l'exemple de la boite de petri qu'on racle) ; les types de reacteurs (continus discontinu), melange ou pas,
Je crois q c a peu pres tout...

• Culture de cellules et montées en échelles (Heiflick,inhibition de
contact,support=ancrage,éléments nutritifs) pour monter en échelle il faut
utiliser plus de plaquettes mais surtout augmenter la surface de celles ci,
pour ça on peut utiliser un empilement de sphères dans un réacteur.


8) Interféron (définition, production, fonctionnement et tout et tout...)


9) Production des interférons.
• (je sais ca a deja ete dit mais j'ai l'impression que celon la tete du client il en demandait plus ou moins...)
J'ai ressorti tout ce qu'il avait dit au cours : son intro avec les pediatres, l'historique (1957 et 1963), le mecanisme ( attention moi il voulait que je lui sorte les details kinase et oligo machin dont je ne me souvenais pas...), les types d'interferons +endroit ou ils sont produits, leur production a partir du sang (globule blanc) puis il m'a cuisinée sur comment en pratique on fait ( faut lui ressortir que les globules blancs ca se divisent pas top, pour les alpha, on doit prendre des cellules de lymphomes ; pour les beta, fibroblastes, il faut lui sortir l'histoire des gens brûlés(5cm, on preleve sur eux ; plus grave, on commande des "rouleaux de peau" produit a partir du prépuce)

• Production d'Intérférons, qu'est ce qu'un intérféron? Plusieurs protéines.
Différents types et où ils sont produits? alpha,beta,gama dans les
leucocytes (alpha),les fibroplastes(beta) et les lymphocytes(gama). Comment
le produire? Comme il est spécifique d'espece il faut utiliser des cellules
humaines. Donc pour les alpha on préleve du sang on centrifuge on obtient
ainsi 3 couches avec les globules rouges dans le fond, les globules
blancs(leucocytes)au milieu et le sérum(je crois?)au dessus. Pour les beta,
on doit prélever des organes.

10) Mécanisme d’action de l’interféron
Refaire le petit schéma du cours :virus induit la production d’un m-RNA qui va traduire un interféron qui sera expulsé et reconnu par les récepteurs d’une autre cellule qui va produire une enzyme (l’interféron ne rentre pas !) donnant l’ordre de production d’interféron et de renforcement de la membrane(ça je suis plus sur).
Interféron empêche la traduction  plus de croissance et de réplication de l’acide nucléique du virus. Immunité non spécifique.
IFN alpha : leucocyte et lymphoblastoïdes (< lymphe infectée par Burkitt -> cellule immortelle se reproduisant indéfiniment sans inhibition de contact, cuve de 8000 litres).
IFN bêta : fibroblastes : produit à partir de prépuce et de fœtus. Possède les mêmes récepteurs que alpha
IFN gamma : lymphocites(apparemment, il les apprécie pas trop), possède des récepteurs différents de alpha et bêta et le gêne codant pour lymphocite contient des introns. Induits par antigènes.


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